Microscopic morphology observation of fracture healing process promoted by panax notoginseng saponins / Observación microscópica de la morfología del proceso de curación de fracturas promovida por panax notoginseng saponins

SUMMARY: The aim of this study was to explore promoting effect of external applying Panax Notoginseng Saponins (PNS) on fractures. For this analysis 18 New Zealand male rabbits were divided into control group, splintage group and PNS group. All rabbits were performed left radius fractures and natural healing, splintage healing and splintage coated with PNS healing. 2 rabbits in each group were sacrificed on day 14, day 28 and day 42 after surgery, separately. Atomic force microscope scanning and nanoindentation tests were performed on the callus sections. The particle size and roughness in PNS group was both less than that in splintage group. The elastic modulus of callus in PNS group was consistent with normal bone tissue started from day 28 after surgery, two weeks earlier than that in splintage group. PNS could significantly reduce fracture healing time and increase strength of callus.

RESUMEN: El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la aplicación externa de Panax Notoginseng Saponins (PNS) en fracturas óseas. Se usaron 18 conejos machos de raza Nueva Zelanda divididos en grupos control, entablillado y PNS. Se realizaron fracturas del radio izquierdo y cicatrización natural en todos los animales, además de la cicatrización con entablillado y entablillado recubierto con PNS. Se sacrificaron, posterior a la cirugía, dos conejos de cada grupo los día 14, 28 y 42. Se realizaron pruebas de escaneo con microscopio de fuerza atómica y nanoindentación en las secciones de callos. El tamaño de la partícula y la rugosidad en el grupo de PNS fue menor que en el grupo entablillado. El módulo elástico del callo en el grupo de PNS fue consistente con el tejido óseo normal iniciado el día 28 después de la cirugía, dos semanas antes que en el grupo de entablillado. El PNS podría redu- cir significativamente el tiempo de curación de la fractura y aumentar la fuerza del callo.

Antidiabetic activity of a triterpenoid saponin isolated from Momordica cymbalaria Fenzl.

Glucose uptake by isolated diaphragms of both diabetic, following streptozotocin administration, and non-diabetic animals increased in presence of an oleanane-type triterpenoid saponin isolated from the roots of M. cymbalaria. Insulin release was augmented by the presence of the saponin of M. cymbalaria (1 mg/mL) in rat insulinoma cell line (RIN-5F) pre-exposed to adrenaline (5 µM) and nifedipine (50 µM). Pancreatic histology also indicated considerable quantitative increase in β-cells (75%) when treated with the saponin. The results suggest that the saponin of M. cymbalaria possesses potential antidiabetic activity with respect to insulin secretion, which may be attributed to modulation of calcium channel, and β-cell rejuvenation.

Immune response of calves inoculated with proteins of Anaplasma marginale bound to an immunostimulant complex / Resposta imune de bezerros inoculados com proteínas de Anaplasma marginale ligadas a um complexo imunoestimulante

Despite our current knowledge of the immunology, pathology, and genetics of Anaplasma marginale, prevention in cattle is currently based on old standbys, including live attenuated vaccines, antibiotic treatment, and maintaining enzootic stability in cattle herds. In the present study, we evaluated the use of an immunostimulant complex (ISCOMATRIX) adjuvant, associated with a pool of recombinant major surface proteins (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4 and rMSP5) to improve the humoral immune response triggered in calves mainly by IgG2. Ten calves were divided in three groups: 4 calves were inoculated with the ISCOMATRIX/rMSPs (G1); 2 calves were inoculated with ISCOMATRIX adjuvant (G2); and 4 calves received saline (G3). Three inoculations were administered at 21-day intervals. In G1, the calves showed significant increases in total IgG, IgG1 and IgG2 levels 21 days after the second inoculation, compared to the control group (p < 0.05), and G1 calves remained above the cut-off value 28 days after the third inoculation (p < 0.05). The post-immunized sera from calves in G1 reacted specifically for each of the rMSPs used. In conclusion, the ISCOMATRIX/rMSPs induced antigen-specific seroconversion in calves. Therefore, additional testing to explore the protection induced by rMSPs, both alone and in conjunction with proteins previously identified as subdominant epitopes, is warranted.

Apesar dos avanços da imunologia, patologia e genética de Anaplasma marginale, a prevenção em bovinos ainda é baseada nas vacinas vivas atenuadas, na terapia com antibiótico e estabilidade enzoótica dos rebanhos bovinos. No presente estudo, avaliou-se o uso de um complexo imunoestimulante (ISCOMATRIX), associado às proteínas recombinantes de superfície (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4 e rMSP5) para melhorar a resposta imune humoral desencadeada em bezerros, principalmente por IgG2. Dez animais foram divididos em três grupos: 4 bezerros foram inoculados com o ISCOMATRIX/rMSPs (G1), 2 bezerros foram inoculados com ISCOMATRIX adjuvante (G2) e 4 bezerros receberam salina (G3). Três doses vacinais foram administradas em intervalos de 21 dias. No G1, os bezerros apresentaram aumentos significativos nos níveis de IgG total, IgG1 e IgG2 21 dias após a segunda inoculação, em comparação com o grupo de controle (p <0,05). Nos bezerros do G1 esses níveis de anticorpos permaneceram acima do ponto de corte 28 dias após a terceira inoculação (p < 0,05). Os soros pós-imunização de bezerros do G1 reagiram especificamente com cada uma das rMSPs utilizadas. Em conclusão, o ISCOMATRIX/rMSPs induziu soroconversão antígeno-específica em bezerros. Portanto, se justifica a realização de ensaios adicionais para explorar a proteção induzida pela rMSPs, tanto sozinhas como em conjunto com novas proteínas identificadas com epítopos subdominantes.

Metabolismo mitocondrial y ultraestructura de músculo esquelético de ratón con restricción calórico proteica / Mitochondrial metabolism and ultrastructure of mice's skeletal muscle with caloric proteic restriction

Para estudiar el metabolismo mitocondrial en este trabajo se utilizó el método de permeabilización del tejido muscular mediante saponina, la cual destruye el sarcolema, manteniendo las mitocondrias "in situ". Para crear un modelo de patología mitocondrial se produjo restricción calórico-proteica (RCP) en ratones adultos con un 50 por ciento de la dieta de los ratones alimentados "ad libitum" durante un período de 15 días. Se efectuaron estudios del consumo de oxígeno, relación ADP/O, así como la actividad enzimática de los Complejos I y II de la cadena respiratoria y la determinación de proteínas. Para evaluar el efecto de la saponina sobre el tejido muscular en presencia y ausencia de restricción calórica-proteica se observaron muestras del mismo al microscopio electrónico de transmisión. Los resultados revelaron en los animales una pérdida de peso, disminución en el consumo de oxígeno y de la relación ADP/O en presencia de glutamato y de succinato, por otra parte se obtuvo una disminución evidente de la actividad del Complejo I, sin modificación del Complejo II. Las observaciones obtenidas con el microscopio electrónico demuestran que la RCP en ratas tiene efecto directo sobre el aparato contráctil de las fibras musculares, produciendo desorganización de las estructuras sarcoméricas y reducción importante de los miofilamentos. La saponina, por otra parte afecta todo el sistema de citomembranas.

In this work, the method of permeabilization of muscular tissue with saponin was employed, which destroyed the sarcolemma but maintained the mitochondria "in situ". To create a model of mitochondrial pathology, a caloric-protein restriction (CPR) was produced in adult mice by reducing 50 percent the diet to fed animals for 15 days. Determinations of oxygen consumption, ADP/O ratio, total proteins, as well as enzymatic activities of respiratory chain Complexes I and II were performed. To evaluate the effect of saponin on muscular tissues under normal or CPR conditions, electron microscopy observations were done. Results of the study showed that the animals in CPR group had loss of weight, reduced total proteins, diminished oxygen consumption, lower ADP/O ratio in the presence of glutamate and succinate, and a notable decrement in the activity of Complex I but without modifications of that of Complex II. Electron microscopic observations demonstrates directs effects of CPR over the contractile apparatus of muscle fibers, such as, disorganization of sarcomeric structures and an important reduction of the myofilaments. On the other hand, saponin affected all cytomembranous systems.

Actividad transaminasa glutámico piruvica y gamaglutamil transpeptidasa en plasma de ratas tratadas con saponinas y glicoalcaloides

El presente trabajo se realizó con la finalidad de evaluar el efecto que tienen los glicoalcaloides y las saponinas sobre las actividades transaminasa glutánico pirúvica (TGP) y gama glutamil transpeptidasa (GGT) en animales de experimentación. Para ello se conformaron tres grupos de 6 ratas cada uno. El grupo A recibió glicoalcaloides, el grupo B recibió saponinas y el grupo C saponinas y luego glicoalcaloides en todos ellos la vía de administración fue la orogástrica. Se dosaron las actividades enzimáticas transaminasa glutámico pirúvica y gama glutamil transpeptidasa plasmáticas en los tres grupos: una determinación basal, a los 5 días y 10 días post tratamiento y luego de 15 días de suspendido el mismo realizarse la última determinación. Se encontró una inhibició significativa la actividad transaminasa glutámica pirúvica en los grupos B y C, más no en el grupo A ésto debido probablemente a que las saponinas producen una disminución en la absorción de micronutrientes orgánicos, de minerales y de vitaminas dentro de estas últimas juega un papel importante los derivados de la piridoxina (B6) que actúa como grupo prostético de las transaminasas. Por otro lado se encontró una elevación ignificativa de la actividad gama glutamil transpeptidasa, y una regresión de dicha actividad enzimática luego de 15 días sin tratamiento iguales a los valores basales, explicada por el daño reversible hepatocelular que producen tanto las saponinas como los glicoalcalides, además de la gran sensibilidad de esta enzima en patología de ese tipo.

Oral toxicity of Madhuca butyracea Macb. saponins to albino rats.

Saponins, isolated from M. butyracea, were assessed for their acute and subacute oral toxicity in albino rats. Acute doses of saponins caused mortalities and LD50 and LD90 values were 330 and 430 mg/kg body wt respectively. Severe diarrhoea, restlessness and histopathological changes were observed in liver and kidney. Diets containing saponins at 0,250,500 and 1000 ppm for 14 weeks did not affect food intake, growth or organ weights, but induced mild histological changes in liver and kidney and altered the serum levels of alkaline phosphatase, blood urea nitrogen, cholesterol and proteins, particularly in female rats.

Nota sobre a variaçäo do comportamento da patogenicidade de imunogecidade de cepas de T. cruzi variedade hastatus E y mutante após longo período de manutençäo em cultura / Note about variation of the patogenicity and immunogenicity of strains of T. cruzi, hastatus and Y, maintained in cultures for longer periods

Neste trabalho nos reportamos a falta absoluta de proteçäo de camundongos isogênicos Balc-C, desafiados com cepa Y de T. cruzi patogênica, que se deu tanto com formas de cultivo epimastigotas e tripomastigotas induzidas em cultivo e delas associadas, quanto com as glicoproteínas de superfície do T.hastatus mais adjuvantes. A cepa do T. hastatus foi a mesma que há anos atrás havia protegido camundongos näo isogênicos desafiados com a mesma cepa Y patogênica. Estes dados sugeriram a perda da imunogenicidade da cepa de T. hastatus, já näo infectante, ao longo de sua manutençäo em cultura. Na mesma ocasiäo, foi constatada a perda da infectividade da cepa Y mutante de T. cruzi mantida por 15 anos em cultura. Consideraçöes de natureza teórica foram feitas admitindo-se que as variaçöes biológicas e de natureza bioquímica ocorrentes com T. cruzi se desenvolvem permanente e evolutivamente, provavelmente em funçäo de mutaçöes na dependência da interaçäo entre o parasita e os componentes do meio em que ele vive